靶向EphA2：对抗肿瘤耐药与转移的新焦点

1. EphA2受体酪氨酸激酶的研究背景

EphA2（Erythropoietin-producing human hepatocellular receptor A2）是Eph受体酪氨酸激酶（RTK）家族的重要成员，该家族是已知最大的RTK亚型，在细胞通讯、发育、形态建成、迁移及黏附中发挥核心作用 ^[1,2]。EphA2的激活依赖于配体结合，能够形成不同构象的寡聚体，引发多样化信号反应 ^[3]，因此在生理与病理状态下均具有广泛影响。

大量研究证实，EphA2在多种恶性肿瘤中高表达，并与肿瘤侵袭性、转移及不良预后密切相关 ^[4-6]。在三阴性乳腺癌中，EphA2高表达与较差生存率显著相关，其基因沉默可抑制细胞增殖与侵袭 ^[4]。类似的促癌效应也出现在结直肠癌 ^[5]、胃癌 ^[7]、卵巢癌 ^[8]、非小细胞肺癌 ^[9]等。EphA2可促进肿瘤细胞增殖、上皮-间充质转化（EMT）^[10]、血管生成 ^[7,11]、转移及耐药形成 ^[12,13]。此外，外泌体EphA2能在细胞间转移耐药性，进一步加剧肿瘤恶性进程 ^[12]。

EphA2信号具有典型的“双重功能”，即配体依赖性（经典）与配体非依赖性（非经典）模式。经典信号多表现为抑癌作用，例如ephrinA1-EphA2结合可通过Ezrin磷酸化调控肌动蛋白骨架，促进细胞极化与黏附 ^[1,2]；而在缺乏配体的肿瘤环境中，EphA2常通过Ser897位点的磷酸化形成非经典信号，呈现促癌特征 ^[14-16]。例如，前列腺癌中雄激素受体（AR）抑制作用的缺失会导致EphA2过表达，并经非经典信号驱动去势抵抗 ^[6,15]。除肿瘤外，EphA2亦参与炎症与免疫过程，如LPS诱导的肺损伤 ^[17]及鼻黏膜抗病毒反应 ^[18,19]。

因此，EphA2因其在多种疾病中的关键作用及信号复杂性，成为具有挑战性的潜在治疗靶点 ^[20,21]。目前针对EphA2的小分子抑制剂、单克隆抗体、ADC药物及纳米递送系统均在积极研发中 ^[22,23]，如抑制剂ALW-II-41-27能抑制宫颈癌生长并逆转结直肠癌耐药 ^[5,24]。此外，EphA2与PARP或HDAC抑制剂联合治疗在卵巢癌中展现协同效应 ^[25,26]。因此，深入理解EphA2信号通路对于靶向治疗开发与耐药机制研究具有重要意义。

2. EphA2的分子背景、结构与基本功能

2.1 Eph受体家族与ephrin配体概述

Eph受体酪氨酸激酶（Eph RTK）家族是介导细胞间通讯的重要分子网络，依据序列同源性与配体特异性分为EphA与EphB两类。EphA受体主要结合GPI锚定型ephrinA配体，EphB受体则与跨膜型ephrinB结合 ^[8]。与其他RTK不同，Eph/ephrin信号依赖细胞间直接接触，其激活需跨膜形成受体-配体复合物 ^[27]。这种结构特征使EphA2在细胞识别、迁移和形态变化中发挥关键作用。例如，EphA2与ephrinA1结合能调节细胞黏附与排斥反应 ^[1,2]，在发育与肿瘤生长中均有重要意义。不同ephrin配体（如EFNA1与EFNA5）在疾病背景中可能具有相反效应 ^[8]，体现了Eph/ephrin信号的高度情境依赖性。

2.2 EphA2结构特点与表达模式

EphA2结构包括胞外配体结合域、跨膜区与胞内酪氨酸激酶域。胞外域负责识别EphrinA配体，胞内域含近膜区、激酶结构域及PDZ结合基序，用以募集下游信号复合物 ^[3]。其激活常伴随受体二聚化与自磷酸化。研究表明，膜胆固醇降低可促进EphA2自组装及Ser897磷酸化，增强其促癌信号 ^[28]。

EphA2在正常组织中广泛表达，如血管平滑肌细胞和鼻窦黏膜 ^[19,29]。但在多种恶性肿瘤中，其高表达是典型特征，与侵袭、转移及预后不良密切相关 ^[20,31]。例如，在TNBC中EphA2促进细胞增殖和骨转移 ^[32]；在胰腺癌中，其过表达增强药物递送效率并提高吉西他滨疗效 ^[33]。此外，EphA2的高表达与鼻咽癌放疗抵抗 ^[34]、前列腺癌去势抵抗 ^[15]、胃癌B3GNT3上调 ^[35]及肝癌CD90阳性细胞迁移 ^[36] 均密切相关。EFNA5的过表达也与卵巢癌患者生存期缩短相关 ^[8]。因此，EphA2不仅是致癌信号枢纽，也是潜在生物标志物与治疗靶点。

2.3 经典与非经典信号传导模式

EphA2信号具有两种主要模式：配体依赖性（经典）与配体非依赖性（非经典）通路。

经典信号由ephrinA1结合触发，通过受体寡聚化和酪氨酸残基自磷酸化激活下游通路 ^[37]。例如，EphA2在血管平滑肌细胞中与ephrinA1结合可抑制ERK1/2与AKT活性，从而抑制细胞迁移 ^[29]。外泌体EphA2在内皮细胞中经EphrinA1依赖通路激活AMPK信号，促进血管生成 ^[11]。

非经典信号则在缺乏配体时被激活，典型标志为Ser897磷酸化 ^[14]。例如，在前列腺癌中，EphA2 S897磷酸化促进去势抵抗与侵袭 ^[6,15]；在血管平滑肌细胞中，该位点磷酸化可增强迁移 ^[29]。MK2-RSK信号轴被认为是EphA2非经典激活的重要上游调节因子 ^[14]。此外，EphA2可被MT1-MMP裂解为促癌性EphA2-NF片段，成为潜在肿瘤标志物 ^[39]。因此，经典信号常表现抑癌效应，而非经典信号多与肿瘤进展相关。

3. EphA2的信号通路与研究机制

EphA2信号网络复杂，涉及多条细胞内通路的交叉调控，尤其是PI3K/AKT、MAPK/ERK、Rho GTPase及Src家族通路。其激活方式（配体依赖或非依赖）直接影响这些下游信号的方向与强度。

3.1 配体依赖的经典信号通路

配体结合诱导EphA2二聚化与酪氨酸自磷酸化，形成经典前向信号 ^[3]。EphA2-ephrinA1信号可通过Ezrin-RhoA通路调节细胞骨架与极性 ^[1]；通过Src-FAK-paxillin轴调控细胞黏附与迁移 ^[27]；并在血管平滑肌细胞中抑制ERK/AKT信号，阻止病理性增殖 ^[29]。此外，EphA2激活后还可诱导配体ephrin-A反向信号，如外泌体EphA2通过EphrinA1激活ERK1/2或AMPK通路，促进肿瘤侵袭与血管生成 ^[11,12]。这表明经典信号具有双向性，既维持细胞稳态，也在特定背景下调节肿瘤进展。

3.2 配体非依赖的非经典信号通路

在缺乏配体或特定应激下，EphA2通过Ser897或Tyr772位点磷酸化形成非经典激活模式 ^[14-16]。Ser897磷酸化由RSK介导，并在前列腺癌、肝癌及血管平滑肌细胞中增强迁移和侵袭 ^[15,29,36]；化疗药物如顺铂亦可通过ERK-RSK-EphA2通路诱导S897磷酸化，导致卵巢癌耐药 ^[40]。Y772位点磷酸化则激活Shp2/ERK1/2信号，驱动鼻咽癌细胞增殖 ^[16]。此外，MT1-MMP裂解、胆固醇降低及SNAI1-PIK3R2相互作用均可促进EphA2非经典信号活化 ^[10,28,39]。这些机制共同塑造了EphA2在肿瘤中的促迁移、促侵袭及耐药特性。

3.3 与主要信号通路的交互调控

EphA2与PI3K/AKT通路广泛交联，常通过上调AKT信号促进细胞存活与迁移 ^{[7,13,35,41,42]}。在胃癌与乳腺癌中，EphA2激活PI3K/AKT通路促进恶性进展 ^[4,35]；而在PTEN缺失背景下，Src激活亦可上调EphA2表达 ^[45]。

MAPK/ERK通路是另一核心轴，EphA2 S897磷酸化常依赖ERK-RSK信号 ^[14,46]，其抑制可恢复化疗敏感性 ^[40]。

此外，EphA2调节Rho GTPase家族以控制细胞骨架重塑 ^[1,24]；与Src激酶协同调节粘着斑动态 ^[27,45]；并可通过Wnt/β-catenin通路驱动EMT与干性维持 ^[10,44]。

这些复杂的信号交互构成了EphA2作为“信号枢纽”的生物学基础，也为靶向治疗提供了多层干预节点。

4. EphA2在相关疾病中的作用

EphA2受体酪氨酸激酶作为细胞信号传导的关键分子，在多种病理过程中具有广泛影响。本章重点概述其在肿瘤发生发展、心血管疾病及炎症反应中的功能机制，强调EphA2信号通路在疾病演进和治疗中的多重角色。

4.1 EphA2在肿瘤发生发展中的作用

EphA2在多种实体瘤中表现出促癌作用，通过调控细胞增殖、迁移、侵袭、EMT转化、血管生成及耐药性形成，驱动肿瘤恶化。以下选取几种研究最深入的癌症类型进行概述。

4.1.1 前列腺癌与去势抵抗

在前列腺癌（PCa）中，EphA2高表达与去势抵抗性进展密切相关 ^[6]。其S897位点的非经典磷酸化可激活致癌信号，促进细胞迁移、侵袭及去分化 ^[6,15]。磷酸化蛋白质组学研究揭示，EphA2激活可引发PI3K/AKT/mTOR及ERK/MAPK通路广泛改变，涉及细胞骨架重塑、运动与连接调节 ^[38]。尽管EphA2具有促癌与抑癌双重潜能，但在CRPC背景下，其非经典信号明显偏向促癌方向。SHB与afadin等衔接蛋白进一步调节EphA2-ERK通路，增强细胞迁移与侵袭能力 ^[38]。因此，阻断EphA2非经典信号被认为是延缓PCa进展的潜在策略。

4.1.2 胰腺癌与早期诊断潜力

EphA2在胰腺导管腺癌（PDC）中过表达，是早期诊断与药物递送的潜在靶点 ^[33]。研究显示，EphA2靶向吉西他滨偶联药物在肿瘤组织中富集度更高，能提高疗效并减少毒性 ^[33]。值得关注的是，基质金属蛋白酶MT1-MMP可裂解EphA2胞外N端，生成促癌片段EphA2-NF ^[39]。血清EphA2-NF水平在PDC患者中显著升高，包括早期病例，与EphA2缺失的组织学特征一致 ^[39]。因此，EphA2-NF可作为一种无创生物标志物，为PDC早期检测与风险评估提供新思路。

4.1.3 结直肠癌与耐药机制

在结直肠癌（CRC）中，EphA2高表达与EGFR靶向药物西妥昔单抗（Cetuximab）耐药密切相关 ^[5]。EphA2激活能触发替代性生存信号，削弱抗EGFR疗效。EphA2抑制剂ALW-II-41-27与西妥昔单抗联合可逆转耐药，抑制肿瘤生长并诱导细胞凋亡 ^[5]。临床分析亦发现EphA2高表达患者的无进展生存期显著缩短。另一方面，CEACAM1-L通过下调EphA2及STAT3信号抑制CRC肝转移 ^[30]，提示EphA2调控肿瘤转移具有情境依赖性。深入解析EphA2与CEACAM家族的交互作用，将有助于开发克服耐药的新策略。

4.1.4 卵巢癌与化疗敏感性调控

高级别浆液性卵巢癌（HGSOC）常因化疗耐药导致复发。研究显示，EphA2与FAK共同调控PI3K/AKT和MAPK/ERK信号，是药物敏感性的重要决定因子 ^[25]。Brigatinib作为双重抑制剂，可协同PARP抑制剂（PARPi）增强凋亡，改善治疗反应 ^[25]。此外，铂类化疗可诱导ERK1/2-RSK1/2-EphA2-GPRC5A信号开关，引发适应性耐药 ^[40]。RSK抑制剂能阻止EphA2 S897磷酸化并恢复铂敏感性 ^[40]。该发现揭示EphA2在化疗耐药形成中的核心地位，也为联合靶向RSK-EphA2通路提供了新方向。

4.1.5 乳腺癌与外泌体信号调控

EphA2在三阴性乳腺癌（TNBC）中高表达，与侵袭性及预后不良密切相关 ^[31]。EPA与EphA2抑制剂联合能通过扰乱胆固醇稳态、抑制ABCA1表达，显著增强细胞凋亡 ^[31]。此外，高转移性乳腺癌细胞释放的外泌体EphA2可激活内皮细胞AMPK信号，促进血管生成与转移 ^[11]。这表明EphA2不仅作为肿瘤内信号分子，也通过外泌体介导细胞间通讯，成为肿瘤微环境重塑的重要因子。

4.2 EphA2在心血管与炎症性疾病中的作用

除肿瘤外，EphA2在心血管与炎症疾病中亦发挥调节作用。研究发现，EphA2与ephrinA1在血管平滑肌细胞中共同维持血管稳态，其配体结合可抑制VSMC迁移与增殖 ^[29]。高同型半胱氨酸血症患者中，EphA2-PI3K/AKT/NF-κB信号被异常激活，导致内皮屏障功能受损 ^[43]。在肺部炎症模型中，EphA2调控LPS诱导的细胞因子释放及屏障完整性 ^[17]。此外，EphA2在鼻窦黏膜中参与抗病毒免疫反应，通过调控上皮细胞分泌与屏障稳定性影响慢性鼻炎病程 ^[18,19]。这些研究拓展了EphA2的功能边界，显示其在免疫与血管生物学中的重要作用。

5. EphA2靶向药物与治疗策略进展

EphA2因其在多种疾病中的关键作用，成为新兴的靶向治疗焦点。当前的药物研究主要集中在小分子抑制剂、抗体药物偶联物（ADC）、核酸干预及纳米递送系统等方向。部分在研管线如下表：

（数据截止到2025年11月4日，来源于synapse）

6. EphA2研究工具

EphA2受体酪氨酸激酶作为信号转导枢纽，在多种肿瘤及炎症疾病中展现双重功能。华美生物提供EphA2研究相关重组蛋白、抗体、ELISA试剂盒，助力您关于EphA2信号双向调控的分子机制研究，或EphA2靶向药物开发。

● EphA2重组蛋白

Recombinant Human Ephrin type-A receptor 2 (EPHA2F), partial (Active); CSB-MP007722HUd7

● EphA2抗体

EPHA2 Recombinant Monoclonal Antibody; CSB-RA007722MA1HU

● EphA2 ELISA试剂盒

Human Ephrin type-A receptor 2(EPHA2) ELISA kit; CSB-EL007722HU

● EphA2稳转细胞株

CHOK1/Human EphA2(207-976) Stable Cell Line; CSB-SC007722HU1