小伙伴在选择使用ELISA试剂盒时,是不是习惯快速扫一眼几个关键点:靶标名字、物种、说明书上的检测范围,参数能够对上,就下单使用。然而实际做完实验之后才发现,结果依旧不尽人意。
通过对多个试剂盒实际应用场景的情况分析,我们发现在ELISA试剂盒选择使用上有一些很常见的误区,大家容易比较忽视,这里总结几点供伙伴们参考。
说明书上的检测范围是试剂盒的所能够匹配的性能参数,但现实中的样本不一定刚好落在这个范围区间。很多小伙伴克勤克俭,喜欢跳过预实验,直接大批量上样,最后才发现样本不在有效区间,珍贵样本直接浪费。
推荐做法应该为,先挑选几个代表性样本进行预实验(可设计梯度稀释),观察预实验样本的数据检出情况,然后再合理安排正式实验(根据预实验结果反馈,来选择是否原液或某一个稀释梯度加样)或考虑更换CUSABIO高灵敏/更宽检测范围的试剂盒。
样本类型描述为“血清/血浆”,默认其它液质类样本都兼容
这一点踩坑的伙伴可真不少。官网/说明书标注可以测血清/血浆,不等于细胞上清液、组织匀浆液、尿液等等全部兼容。够买试剂盒之前最好留意说明书的样本类型提示,也可提前咨询技术人员。CUSABIO ELISA试剂盒可以检测天然样品,根据靶点性质对多种天然样本进行选择测试(血清,血浆、细胞上清等),为客户提供最真实的实验数据参考。
把跑Q结果(qPCR),直接拿来预判ELISA结果
基因上调,不代表蛋白浓度就一定同步升高。有些蛋白只检测分泌型,基因表达升高,但蛋白滞留在胞内,上清液里面检测不到。很多伙伴做完实验,qPCR和ELISA趋势矛盾,第一反应怀疑试剂盒坏了,其实在排除试剂盒本身质疑后,也有可能是检测的蛋白形式不一样。这点做细胞上清检测的时候尤其要注意。
小动物实验周期长,很多人做着做着试剂盒用完了,就临时再买试剂盒(此时可能只有新生产批次了)。不同生产批次,就算同一货号,也会存在差异。同系列动物样本,尽量采用同一批次试剂盒全部测完;如果样本量太大,也要记得设置同批的质控样本,用来校正板间差异;保证数据分析时候的条件一致性。
华美生物CUSABIO的ELISA试剂盒,在设计产品的时候,会尽量把这些潜在问题摸排出来,样本适用类型、稀释建议等等都会有所描述,方便大家提前判断。
ELISA产品线覆盖三千多个靶标,既有满足常规需求的标准版,也有针对低丰度样本的高敏、微量、IS系列,不同规格包装,适配预实验、小批量样本、大批量动物实验不同场景。每一批试剂盒都会做完整的方法学验证,包括精密度、基质回收率、特异性,尽量减少批次之间的波动。
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