直播回放|华美讲堂第十九期：ELISA原理与操作要点深度解析

一般华美生物96T的盒子，提供的是2支标准品，如果其中一支已经溶解，可以先放2-8°，保存好，避免污染，这样保存一般不超一周，当然其他梯度暂时先别配制了。

其实ELISA相对比较简单，若是首次的话，咱们肯定要先仔细阅读说明书，用自己熟悉的方式标出重点，避免不必要的情况发生，华美生物官网也有操作视频，中间有疑问的话，也可以随时联系华美生物；另外首次做的话，最好先做下预实验练下操作。

预实验一般设置在12-16个孔，包含标准品点在内，注意没有用到的板条拆下来，放铝箔袋密封保存。

是的，华美生物ELISA试剂盒一般上样量都是50-100μl，对于有些样本，可能需要一定的稀释，若样本量确实不多的话，可以做下小倍数的稀释，当然这种稀释的话可能会导致不检出，尽量多准备充足；

试剂盒的效期一般是6个月，若超效期的话，还想用的话，一定要先做预实验，样本量充足的话，也可以带几个样，先看情况再说。

华美生物ELISA试剂盒大概有4000多种，针对细胞样本，华美生物确实无法该函全，而且细胞样本又多，每种细胞不太一样，因此这类样本检测的时候要结合预实验。

试剂盒确实很多，可以说琳琅满目，选择的时候要结合自己的需求、品牌以及综合反馈，后期华美生物也将推出这类讲座，敬请关注。

标曲拟合一般采用曲线模型，拟合时可以用curve expert，为了计算方便多以OD为X轴，浓度为Y轴进行拟合，将数据输入软件自动拟合最佳方程，选择r最佳的曲线（当“r”值越接近1拟合度越好），双抗法多采用rational function，具体可以参考：ELISA Kit操作视频及标准曲线绘制；也可以用excel里面的散点图进行多项式拟合。

这种情况可能是蛋白凝集产生，不建议加热，可离心去掉。