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白细胞介素6(IL-6)的测定方法及正常范围

人阅读 发布时间:2024-01-22 16:16


白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)是一种炎症因子,由212个氨基酸组成的糖蛋白,检测IL-6有助于评价糖尿病、心血管病、炎症性疾病和感染性疾病等。患者IL-6的连续监测,有助于评估炎症反应的严重程度,脓毒症及其预后情况;日本指南推荐将IL-6用于脓毒症辅助诊断,IL-6可以作为脓毒症的早期预警指标。
 
研究发现,2019-nCoV感染的患者血清中白细胞介素6(IL-6)等炎症细胞因子显著升高。患者血清中IL-6的含量有助于新型冠状病毒肺炎的临床分型及预测疾病严重程度和患者预后。《新型冠状病毒肺炎诊疗方法(试行第七版)》将外周血炎症因子IL-6进行性上升作为新型冠状病毒肺炎重型、危重型临床预警指标。
 
白介素6(IL-6)作为感染性疾病的早期诊断、病情评估、疗效监控和预后判断的诊断指标。IL-6的准确测定具有重要意义。
 
白细胞介素6(IL-6)检测的正常范围是多少?
白细胞介素6(IL-6)的正常参考值是在0.373~0.463ng/L,检测结果在这个范围之内,都属于正常指标,说明没有出现病变的情况。如果白介素6检查结果明显高于了正常范围值,就属于一种病理性的反应,也说明体内出现了炎症因子,存在炎症感染。
 
白细胞介素6(IL-6)的测定方法有哪些?
根据IL-6的检测原理及方法的不同,对白介素6的检测分为:免疫学方法、生物学检测方法。
 
免疫学方法
免疫分析方法的原理为利用特定抗体与抗原发生的特异性识别和结合,对待测抗体或者抗原进行分析测定的方法。这种方法的特点是对于待测样品的前处理要求较小,不会被待测样品中的其他物质所影响,所以特别适合于对于人体的体液和血液进行直接检测。常用的检测方法包括:酶联免疫法、免疫放射法、电化学免疫法、化学发光法等方法。
 
酶联免疫法
酶联免疫法是19世纪70年代发展起来的一种免疫测定技术,其测定原理是基于抗原与抗体的特异性结合反应,通过将待测物与酶连接,通过分析酶与底物的反应颜色标定待测物的浓度。白细胞介素6(IL-6)酶联免疫法测定已有商品化试剂盒供应,IL-6酶联法检测的试剂盒一般采用双抗体夹心法,具有灵敏度高、抗干扰性强且不需要复杂设备的优点。Nobuo Id3a等人采用ELISA的方法检测了人源IL-6的含量,检测限为9.5 ng/mL,此方法和生物测定法有良好的相关性。
 
免疫放射法
免疫放射法是利用同位素标记的与未标记的抗原,同抗体发生竞争性抑制反应的方法。邱玉华等在对单抗识别抗原位点鉴定的基础上,建立了稳定、可靠的白细胞介素6(IL-6)免疫放射检测方法。其灵敏度为5 pg/mL,检测范围为5~200 pg/mL。具有灵敏度高,特异性强,用量少等优点,但同时操作时间长,仪器价格高。
 
电化学免疫法
电化学免疫法是将免疫技术与电化学检测技术相结合的一种免疫分析新方法,具有灵敏度高、光信号线性好、检测范围宽、重复性好等优点。席杰等人利用将标本、生物素化的白细胞介素6(IL-6)单克隆抗体和三联吡啶钌标记的IL-6单克隆抗体反应以形成抗原抗体夹心复合物,然后与加入的链霉素和亲包被的磁微粒,形成链霉亲和素磁颗粒-生物素抗体-抗原-钌抗体复合物,通过磁场洗涤将未结合物冲洗除去,根据三联吡啶钌在电极上发生的光强度检测样本中IL-6水平。该方法的最低检测限为1.5 pg/mL,线性范围为1.5~5000 pg/mL,准确度为0.900~1.100,批内变异小于8%,批间变异小于10%。
 
化学发光免疫分析法

化学发光免疫分析法包含两个部分,即免疫反应系统和化学发光分析系统。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体)直接标记在抗原(化学发光免疫分析)或抗体(免疫化学发光分析)上,或酶作用于发光底物,通过测定发光强度的对待测物进行定量的形式。化学发光法具有灵敏度高、选择性好、检测范围广等特点。Lirong Luo等人采用化学发光免疫方法检测人源白细胞介素6(IL-6)的含量。IL-6检出限为0.5 pg/mL,检测范围为4~625 pg/mL,临床血清中的添加回收实验范围为91.5%~109.4%。
 
量子点免疫层析技术
量子点以其受激发光照射发出荧光的特性本被视为新的理想的免疫标记物。程云龙等人建立了一种基于量子点标记技术和免疫层析技术的IL-6的检测方法,在偶联剂碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(N-hydroxysuccinimide,NHS)作用下,使抗白细胞介素6(IL-6)单克隆抗体I(Ab1,小鼠)与羧基量子点(CdSe/ZeS)偶联,制备量子点标记物;以抗IL-6单克隆抗体Ⅱ(Ab2,小鼠)作为捕获抗体,建立双抗体夹心量子点免疫层析法试纸条检测IL-6,灵敏度为2.0 pg/mL;检测限为0.79 pg/mL,线性范围为2.0~5000 pg/mL。
 
生物学检测方法
生物学检测是一测定IL-6依赖性细胞株的增值情况的检测方法,细胞的增值与IL-6的浓度水平呈比例关系,根据增值情况测得IL-6的浓度。汪革非等人根据IL-6依赖细胞株7TD1的特性采用MTT比色法与XTT方法进行比较检测白细胞介素6(IL-6)的生物学活性,根据吸收值得出对应IL-6的浓度。XTT法测得样品活性为3.48×106U ml。
 
 
参考文献
[1]邱玉华,苏成海,谢炜,等.IL-6免疫放射法检测方法的建立及其应用[J].现代检验医学杂
志.2003,18(02):14-16.
[2]席杰,梁辰,薛辉,等.人血清IL-6电化学发光检测方法的建立[J].标记免疫分析与临
床.2019,26(09):1574-1578.
[3]程云龙,于林,李双法,等.基于量子点免疫层析技术的IL-6定量检测方法建立[J].世界医学信息文摘,2019,19(20):199-200.
[4]汪革非,邸丽莹,袁志宏,等.应用XTT法检测白细胞介素-6的生物学活性[J].中国生物制品学杂志.1999(02):109-110.
[5]Hatzidaki E,Gourgiotis D,Manoura A,et al.Interleukin-6 in preterm premature rupture of membranesas an indicator of neonatal outcome[J].Acta Obstet Gyn Scan,2015,84(7):632-638.
[6] Zumla A,Hui DS,Azhar El,et al.Reducingmortality from 2019-nCOV:host-directed therapiesshould be an option[J].Lancet,2020,395(10224):e35-e36.
[7] 燕茹,林婧等.白细胞介素-6定量方法研究进展.
 

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