直播回放| ELISA常见样本处理方法与检测分析

处理血液样本前，需注意需要分清是血清还是血浆，二者明显区别在于纤维蛋白原。若是血清的话，需要自然凝固或利用促凝管收集；
若是血浆的话，避免血液凝固影响实验结果，需借助抗凝管，一般常用的抗凝剂有EDTA、肝素、柠檬酸等，市面也有现场的抗凝管。
同时，样本的离心处理要恰当，以充分分离出血清或血浆，去除红细胞和其他细胞成分。此外，样本的保存条件也需严格控制，以防止样本变质。

溶血可由多种理化因素和毒素引起。在体外，机械性强力振荡、低温冷冻等诱因均可引起溶血。为避免溶血对检测结果产生影响，应注意：
（2）一次性采血量不宜过少；
（3）采集的全血不宜激烈振荡；
（4）离心转速不宜过大；
（5）收集的全血需尽快处理成血清/血浆，全血不能冻融；

是的，不同类型的样本具有不同的成分和特性，因此需要采用不同的处理方法。例如，处理组织样本时，可能需要进行匀浆、离心等步骤以提取目标成分；而处理细胞裂解液样本时，则需要进行裂解等步骤。正确的处理方法能够确保样本中的靶物质得到准确检测。

小鼠个体是比较小，可以采取不同的采血方法，比如尾静脉、眼眶静脉、颌下静脉，也有心脏采血。当然尾静脉可能采不到很多，可以尝试眼眶静脉和颌下静脉，我们用的比较多是眼眶采血（7号）。若没有后继实验需求，可以用心脏采血。

ELISA 实验中假阳性结果可能由多种因素引起，如样本处理不当(如样本
污染、非特异性物质干扰等)、试剂问题(如试剂过期、污染等)、实验操作不
规范(如洗涤不充分、加样不准确等)以及仪器误差等。

为了保证实验结果的准确性，我们建议标准品和样品都做复孔，但并不强行要求一定要做复孔/3 复孔，可根据自己的需求设定复孔实验。

虽然 ELISA 实验的操作步骤相同,但每次实验的各种影响因素都会有所变化。所以，每次实验时，都必须重新绘制标准曲线，以得到更准确可靠的检测结果。

一般情况下，若有条件的话，建议分装；如果确实不方便或有实验方面的需求，据经验看，一般控制在2次，此时对样本所处区间影响不大，但每个指标不同，有些可能影响比较大。所以综合建议，尽量分装，注意分装时给予试管一定的膨胀空间。

目前对于软件确实没办法批量计算浓度，这时可以借助excel进行批量计算。先将公式复制到excel文档中，注意调整a,b,c等常数项然后输入=号进行编辑函数，拖拽即可批量计算。可以参考链接：
www.cusabio.cn/technology-86.html