直播回放|ELISA实验结果解析

答：主要参考实际浓度情况和试剂盒的检测范围，直观看也就是样本的稀释倍数，例如我们小鼠ADP指标，我们小鼠血清推荐的稀释倍数是2000倍稀释，这时候小稀释倍数去检测就会出现带现象，但小鼠LPS，小鼠血清我们推荐的是原液检测，那么出现OD随浓度升高而升高就是出现的基质干扰。

答：没有540和570nm的波长没有关系，这两个波长只是作为辅助波长，用来做双波长的校正用的，只要有450nm的滤光片就可以了，这个450nm是必须有的，因为所用的显色剂、终止液的成分是需要在450nm波长下进行测定的。

答：这种情况为抗原抗体的匹配性问题，这个在科研上也是常遇到的，不同的表达方式、不同的系统获取的蛋白，可能在结构或空间构象上存在一定的细微变化，生物活性可能都是存在的，但不一定具有相似的免疫性，同等的亲和力，所以可能会不被试剂盒抗体识别到。重组蛋白无法检出这一现象，并不能说明这个蛋白不好或者是试剂盒不好，只是这个蛋白和试剂盒抗体的匹配性不好。

答：先不论该指标是否会出现一定程度的降解，长时间的保存，样本也是会发生其他的变化的。一个是样本有一定程度的污染，其内会含有内源性的慢性生长菌，哪怕是过滤后的样本，也是有滤过性细菌和病毒的（比如说内源性HRP），而它们的代谢物是可能会引起样本测值的升高或降低的。另一个是血清样本的凝血不彻底，时间久后，会有纤维蛋白原的析出，而造成样本测值的升高或降低。

答：标准品最高点显色终止后产生棕色沉淀物，这个是属于正常现象，这种情况是因为显色过高，显色剂中物质在酸化后发生的凝集，一般在终止后，2min内读值，这种现象还未发生，读值是较为准确的，当已出现棕色沉淀物后，再读值，该孔就会比实际的测值偏低，这时候处理数据该点就需去掉再绘制标曲。

答：两种方式都会考虑，要结合整个标曲的走势来决定。

答：不管什么环节加错试剂，对检测结果都会有一定的影响的，加错不同的试剂，加错的时间，发现的时间对实验结果的影响程度都不同，具体需要结合实际情况以及实验结果来看。一般加错标准品/样本/生物素标记抗体/辣根过氧化物酶等，如果当下发现，立即弃掉液体，对板子进行适当清洗，再重新加入正确试剂，可以继续完成实验，根据结果来分析影响程度大小，如果是在错误的步骤加入了TMB或者终止液，那实验基本无挽救措施。所以实验务必严格按照说明书步骤进行。

答：二者有点相似，最后的结果都是OD值与浓度呈反比，但原理上就不同，实验步骤也就有区别。

答：细胞上清细胞量没有硬性要求，主要是取决于客户的实验方案，但是细胞分泌到上清中的含量与细胞状态，细胞数目，刺激情况都密切相关，所以实验前务必先预实验确认样本浓度情况。