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重磅推出 | 简便、快捷的植物直扩PCR试剂盒

562 人阅读发布时间:2023-09-21 17:04

常规的PCR扩增,一般采用CTAB或者基因组提取试剂盒进行gDNA提取,通过一系列比较复杂的步骤,去除基因组DNA模板中的抑制剂和蛋白成分,得到纯度较高、质量较优的DNA模板。然后,在此gDNA模板的基础上,进行后续的PCR扩增工作。以及常规PCR扩增,需要提前进行核酸提取,整个过程耗时且繁琐,增加了实验的工作量,拖慢了实验进度。因此,直扩PCR应运而生。

什么是直扩PCR?直扩PCR,也叫直接PCR(Direct PCR),是一种不需要提取DNA样本就能实现DNA扩增的技术,省去了繁琐的核酸提取过程。

常见的植物直扩PCR,一般要进行粗裂解,离心,然后取上清进行后续的PCR过程。具体步骤如下图所示:

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可以看出,常规的植物直扩PCR,需要进行30分钟的粗裂解,依然有一个核酸提取过程,工作量并不能显著降低。

华美生物基于此,开发出不需要粗裂解的植物直扩PCR预混液,直接取样配置PCR扩增体系,就可以高效的进行PCR扩增,1K以内基因片段扩增结果与gDNA试剂盒提取的PCR扩增结果一致。华美生物植物直扩PCR预混液工作流程图及预混液产品如下:

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产品组分 

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产品优势 
强耐抑制剂DNA聚合酶:经过定向进的改造的Taq DNA 聚合酶,在不改变扩增性能的情况下,大幅度提升了该酶对植物中PCR 抑制物的耐受性。
宽广的样本兼容性:适合各种常见植物叶片及种子样品的扩增。
极简操作:无需繁琐的DNA 提取步骤,亦不需要粗裂解,直接使用少量叶片,即可进行PCR,节约大量操作环节。


实验案例 
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备注:
快速植物直扩PCR:取1mm叶片直接配置PCR体系扩增,扩增程序:95℃ 5min,循环程序95℃ 15s,58℃ 15s,72℃ 30s,共35 cycle,72℃ 5min,20℃ 2min。
常规植物直扩PCR:取1mm叶片直接配置PCR体系扩增,扩增程序:95℃ 5min,循环程序95℃ 30s,58℃ 30s,72℃ 50s,共35 cycle,72℃ 5min,20℃ 2min。
对照:采用CTAB法或者基因组提取试剂盒提取核酸,然后配置PCR mix进行扩增,扩增程序:95℃ 5min,循环程序95℃ 30s,58℃ 30s,72℃ 50s,共35 cycle,72℃ 5min,20℃ 2min。
华美生物植物直扩PCR预混液,不需要核酸粗提取,采用快速扩增程序与常规扩增程序进行PCR直扩,与抽提植物DNA模板扩增得到结果一致。

订购信息
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