逆转录酶核心原料的选择——M-MLV逆转录酶

逆转录酶是一种用于从RNA模板生成互补DNA (cDNA)的酶，是cDNA合成和RT-qPCR反应中的核心成分。其中MMLV最为常见，它是一种重组DNA聚合酶，可以从单链RNA、DNA或RNA:DNA杂交中合成互补的DNA链。如何为RT-PCR反应选择最佳的MMLV逆转录酶，是实验成功的第一关。

传统MMLV不耐高温，只能在相对较低的温度(50°C)下维持其活性。但是在cDNA合成的步骤当中，高的逆转录温度有助于RNA二级结构的打开和高GC含量的RNA的变性，提高引物与目标基因结合的特异性，从而能增加cDNA合成的产量和PCR过程的扩增效率。与野生型MMLV逆转录酶相比，本公司改造的逆转录酶M-MLV Reverse Transcriptase展现出更高的热稳定性，低RNase H活性和高抑制物耐受性，与其他耐高温逆转录酶相比，有更高的cDNA合成率。它可以在高达60°C的温度下的完成第一链cDNA合成，适用于具有高二级结构(如病毒基因组)的RNA的逆转录。

本公司在此基础上研制的一步法RT-qPCR试剂(One Step RT-qPCR Kit)是以RNA为模板，在同一反应管中进行逆转录和定量PCR反应的试剂盒，简化了实验操作。体系中包含RNA酶抑制剂、UDG等，能减少RNA模板降解，防污染。优化后的缓冲和酶系能够提高逆转录合成效率，而且耐受度高，具有一定的抗抑制效果，适用于多种模板荧光探针法（一步法扩增）的特异性检测系统。

产品数据

1）与同类产品SDS-PAGE电泳检测对比

2）与同类产品的逆转录温度测试对比
3）加速热稳定性

另外，本公司开发的RTX Reverse Transcriptase是经过基因工程改造的全新逆转录酶，具有更高的热稳定性和更高的盐耐受能力，可用于具有二级结构的RNA 模板的逆转录。逆转录温度在60-70°C具有更优的活性，同时具有DNA和RNA聚合能力，可完成 cDNA合成和RT-LAMP实验。

武汉华美生物工业原料事业部持续专注开发优化用于DNA和RNA检测的创新高效酶，也一直对MMLV逆转录酶进行不断地改进和优化，提供免费试用服务，欢迎咨询。

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